微生物培養(yǎng)步驟：
1.配置不同濃度的營(yíng)養(yǎng)液稀釋液:取營(yíng)養(yǎng)液1ml溶于9ml無(wú)菌水中,振蕩 5min配成10%的溶液.
2.將容器口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰用吸管從此溶液中吸取1ml加入到裝有9ml無(wú)菌水的試管中.以此類推制成1%,0.1%,0.01%等不同濃度的稀釋液.
3.將試管口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰,左手拿試管,右手托培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰).將溶液倒入培養(yǎng)皿中,在各培養(yǎng)皿上標(biāo)上濃度.
4.將有細(xì)菌生長(zhǎng)的樣品容器口靠近(注意不是對(duì)著)酒精燈燈焰,用接種環(huán)挑取菌落上的少量菌體加入10%的營(yíng)養(yǎng)液中.把接種環(huán)放在酒精燈上灼燒滅菌,再次取樣加入盛1%的營(yíng)養(yǎng)液的培養(yǎng)皿(僅露一條小縫,且靠近燈焰)中.重復(fù)這個(gè)操作,將各濃度的營(yíng)養(yǎng)液接上種.
5.輕輕搖勻接上種的培養(yǎng)皿,置于恒溫箱內(nèi)37攝氏度保存,3天后就有菌落出現(xiàn).
微生物培養(yǎng)的基本條件：
1、影響微生物生長(zhǎng)的因素
微生物的生長(zhǎng)，除了受本身的遺傳特性決定外，還受到外界許多因素的影響。影響微生物生長(zhǎng)的因素很多，簡(jiǎn)要介紹如下。
1） 營(yíng)養(yǎng)物濃度
細(xì)菌的生長(zhǎng)率與營(yíng)養(yǎng)物的濃度有關(guān):μ=μmax*C/(K C) ，營(yíng)養(yǎng)物濃度與生長(zhǎng)率的關(guān)系曲線是典型的雙曲線。
K值是細(xì)菌生長(zhǎng)的很基本的特性常數(shù)。它的數(shù)值很小，表明細(xì)菌所需要的營(yíng)養(yǎng)濃度非常之低，所以在自然界中，它們到處生長(zhǎng)。然而營(yíng)養(yǎng)太低時(shí)，細(xì)菌生長(zhǎng)就會(huì)遇到困難，甚至還會(huì)死亡。這是因?yàn)槌松L(zhǎng)需要能量以外，細(xì)菌還需要能量來(lái)維持它的生存。這種能量稱為維持能。另一方面，隨著營(yíng)養(yǎng)物濃度的增加，生長(zhǎng)率愈接近最大值。
2）溫度
在一定的溫度范圍內(nèi)，每種微生物都有自已的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)：最低生長(zhǎng)溫度、最適生長(zhǎng)溫度和最高生長(zhǎng)溫度。在生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)內(nèi)，微生物都能生長(zhǎng)，但生長(zhǎng)速率不一樣。微生物只有處于最適生長(zhǎng)溫度時(shí)，生長(zhǎng)速度才最快，代時(shí)最短。超過(guò)最低生長(zhǎng)溫度，微生物不會(huì)生長(zhǎng)，溫度太低，甚至?xí)劳?。超過(guò)最高生長(zhǎng)溫度，微生物也要停止生長(zhǎng)，溫度過(guò)高。也會(huì)死亡。一般情況下，每種微生物的生長(zhǎng)溫度三基點(diǎn)是恒定的。但也常受其它環(huán)境條件的影響而發(fā)生變化。
根據(jù)微生物最適生長(zhǎng)溫度的不同，可將它們分為三個(gè)類型：
a.嗜冷微生物：其是適生長(zhǎng)溫度多數(shù)在-10℃－20℃之間
b.中溫微生物：其最適生長(zhǎng)溫度一般在20℃－45℃之間
c.嗜熱微生物：生長(zhǎng)溫度在45℃以上。
3）水分
水分是微生物進(jìn)行生長(zhǎng)的必要條件。芽孢、孢子萌發(fā)，首先需要水分。微生物是不能脫離水而生存的。但是微生物只能在水溶液中生長(zhǎng)，而不能生活在純水中。各種微生物在不能生長(zhǎng)發(fā)育的水分活性范圍內(nèi)，均具有狹小的適當(dāng)?shù)乃只钚詤^(qū)域。
4）氧氣
按照微生物對(duì)氧氣的需要情況，可將它們分為以下五個(gè)類型。
a.需氧微生物：這類微生物需要氧氣供呼吸之用。沒(méi)有氧氣，便不能生長(zhǎng)，但是高濃度的氧氣對(duì)需氧微生物也是有毒的。很多需氧微生物不能在氧氣濃度大于大氣中氧氣濃度的條件下生長(zhǎng)。絕大多數(shù)微生物都屬于這個(gè)類型。
